摘要:在ACQUITY UPC2 TM系統上使用沃特世(Waters?)超高效合相色譜技術分離典型跨膜肽-短*的方法,可得到線性和可重復的結果,測定的OTC制劑濃度為標示量的98.4%,是準確、高精度分析短*的方法。
短*是由芽孢桿菌產生的一種常見和已被良好表征的跨膜肽物質,被用作對抗革蘭氏陽性和某些革蘭氏陰性細菌的局部用抗生素。用反相液相色譜(RPLC)分析疏水性肽和蛋白質難度很大。因為溶液中經常需要使用洗滌劑保持疏水性物質的穩定性,而這些洗滌劑容易發生聚集或沉淀,嚴重影響它們的回收,這些因素及其他原因使得難以用RPLC分離疏水性肽和蛋白質。
沃特世解決方案:ACQUITY UPC2系統;ACQUITY? SQD;ACQUITY UPC2 CSH氟苯基色譜柱;EmpowerTM 3軟件。
實 驗
除非另有說明,以下是用于所有色譜最終方法的條件。
1.UPC2測試條件
UPC2系統: ACQUITY UPC2;檢測器:PDA、ACQUITY SQD PDA@280nm,分辨率為6nm(補償400~500nm);色譜柱:ACQUITY UPC2 CSH氟苯基,3.0mmx100mm,1.7